Quantification of the neurons of myenteric plexus of the bat molossus rufus / Quantificação dos neurônios do plexo mientérico de morcegos da espécie Molossus rufus

There are no studies that characterize the enteric nervous system (ENS) bats. The organization and density of myenteric neurons may vary according to the animal species, as well as the segment of the digestive tube considered. The nitric oxide is one of the key neurotransmitters present in the myenteric neurons, acting as a mediator in the smooth muscle relaxation. These neurons are evidenced by immunohistochemistry of nitric oxide synthase (NOS) or by NADPH-diaphorase histochemistry. In this sense, this study aimed to characterize the total neuronal population and subpopulation NADPH-d+ of the myenteric plexus present in the jejunum of the insectivore species Molossus rufus quantitatively. Five specimens were collected of M. rufus in a buffer area of the "Reserva Biológica das Perobas" in the microregion of Cianorte/PR. After the euthanasia, in a chamber saturated with isoflurane, segments were collected from the small intestine corresponding to the jejunum intended for two techniques for neuronal marking, Giemsa and NADPH-diaphorase, and a fragment to the histological technique of hematoxylin-eosin and Masson's trichrome. All the procedures were approved by the "Comitê de Ética no Uso de Animais Unipar" (CEUA - protocol No. 34347/2017) and the "Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade" (ICMBio - protocol No. 60061-1) The histological sections allowed to highlight the location of the myenteric plexus between the longitudinal and circular layers of the muscular tunic. The myenteric plexus had an average of total neuronal population (neurons Giemsa+) of 279.23 neurons/mm2, being the nitrergic neurons (neurons NADPH-d+) represented 20.4% of this total population, with an average of 58.14 neuron/mm2. Therefore, the collected data are consistent with previous studies in other mammalian species concerning the location of the myenteric plexus, as well as the neural myenteric proportion NADPH-d+ compared with the population of neurons Giemsa+. The gaps in the knowledge of ENS of bats limits comparative intraspecific and interspecific studies.(AU)

Não há estudos que caracterizem o sistema nervoso entérico (SNE) destes animais, configurando uma lacuna no conhecimento quanto à biologia destes indivíduos. A organização e densidade dos neurônios mientéricos podem variar de acordo com a espécie animal bem como o segmento do tubo digestório considerado. O óxido nítrico é um dos principais neurotransmissores presentes nos neurônios mientéricos, atuando como mediador no relaxamento do músculo liso gastrointestinal, de modo que estes neurônios são evidenciados igualmente pela imunohistoquímica da óxido nítrico-sintase (NOS) ou pela histoquímica da NADPH-diaforase. Neste sentido, objetivou-se caracterizar quantitativamente a população neuronal total e subpopulação NADPH-d+ do plexo mientérico presente no jejuno da espécie Molossus rufus de hábito alimentar insetívoro. Foram coletados cinco espécimes de M. rufus em área de amortecimento da Reserva Biológica das Perobas na microrregião de Cianorte/PR. Após a eutanásia, em câmara saturada com isoflurano, foram coletados segmentos do intestino delgado correspondentes ao jejuno destinados a duas técnicas para marcação neuronal, Giemsa e NADPH-diaforase e, um fragmento para a técnica histológica de hematoxilina-eosina e tricômio de Masson. Todos os procedimentos realizados foram aprovados pelo Comitê de Ética no Uso de Animais da Unipar (CEUA - protocolo nº 34347/2017) e pelo Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (ICMBio - protocolo nº 60061-1) Os cortes histológicos possibilitaram evidenciar a localização do plexo mientérico entre os estratos longitudinal e circular da túnica muscular. Neurônios Giemsa+ apresentaram uma média de 279,23 neurônios/mm2, já os neurônios nitrérgicos apresentaram em média 20,4% da população neuronal mientérica total, sendo evidenciados 58,14 neurônios NADPH-d+/mm2. Portanto, os dados coletados mostram-se condizentes com estudos anteriores em outras espécies de mamíferos quanto à localização do plexo mientérico, bem como, a proporção neuronal mientérica NADPH-d+ comparada com a população de neurônios Giemsa+. As lacunas existentes quanto ao conhecimento do SNE de morcegos limita possíveis inferências em comparativo intraespecífico e interespecífico.(AU)

A new experimental model of intrinsic denervation in ileum from wistar rats through intramural microinjections of benzalkonium chloride / Um novo modelo experimental de desnervação intrínseca em íleo de ratos wistar através de micro injeções intramurais de cloreto de benzalcônio

Extensive literature is available about the intrinsic denervation of segments of the digestive tube through the application of CB in the serosa of the viscera. However, this technique has some disadvantages like causing peritonitis, flanges and high mortality, limiting its use in humans. The aim of the present study was to evaluate the feasibility of benzalkonium chloride (CB) to induce intrinsic chemical denervation, through applications of CB in the intramural ileum of wistar rats, as well as deepen the knowledge about the evolution of neuronal injury caused in the process. We used 40 rats, divided into two groups (control-GC and benzalkonium-GB) of 20 animals each, divided into four sub-groups according to the time of postoperative assessment of 24, 48 hours, 30 and 90 days. The animals were submitted to intramural microinjections of sterile saline solution 0.9% (GC) or benzalkonium chloride (GB) in ileal portion, and subsequent histopathological analysis and immunohistochemistry for evaluation of neuronal injury. A significant decrease (p<0.05) was found of the neuronal myenteric count over time in groups, GB3, GB4 and GB2. The specific positive immunolabeling for H2AX and Caspase-3 confirmed the results obtained in the histopathological evaluation, denoting the ignition of irreversible cell injury in 24 hours, evolving into neuronal apoptosis in 48 hours after application of the CB 0.3%. Under the conditions in which this work was conducted, it can be concluded that the application of CB 0.3% by means of microinjections intramural in the ileal wall is able to induce intrinsic chemical denervation of the diverticulum of wistar rats and that the main mechanism of neuronal death is induction of apoptosis.(AU)

Existe vasta literatura sobre a desnervação intrínseca de segmentos do tubo digestório através da aplicação de CB na serosa da víscera. Entretanto, essa técnica tem a desvantagem de causar peritonite, formação de bridas e alta mortalidade, não sendo factível para eventuais utilizações em humanos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a viabilidade do Cloreto de benzalcônio (CB) induzir desnervação química intrínseca, por meio de aplicações intramurais em íleo de ratos wistar, além de aprofundar o conhecimento sobre a evolução da lesão neuronal causada neste processo. Foram utilizados 40 ratos, distribuídos em dois grupos (controle- GC e benzalcônio- GB) de 20 animais cada, subdivididos em quatro subgrupos de acordo com o tempo de avaliação pós-operatória de 24, 48 horas, 30 e 90 dias. Os animais foram submetidos à microinjeções intramurais de solução salina estéril 0,9% (GC) ou de cloreto de benzalcônio (GB) em porção ileal, e posterior análise histopatológica e imuno-histoquímica, para avaliação da lesão neuronal. Houve diminuição significativa (p<0,05) na contagem neuronal mientérica ao longo do tempo nos grupos GB2, GB3 e GB4. A imunomarcação específica positiva para H2AX e Caspase-3 confirmou os resultados obtidos na avaliação histopatológica, denotando início da lesão celular irreversível em 24 horas, evoluindo para apoptose neuronal em 48 horas após a aplicação do CB 0,3%. Nas condições em que este trabalho foi conduzido, é possível concluir que a aplicação de CB 0,3% por meio de microinjeções intramurais na parede ileal é capaz de induzir desnervação química intrínseca da porção ileal de ratos wistar e que o principal mecanismo de morte neuronal é a indução de apoptose.(AU)

Different inoculum loads of Toxoplasma gondii induce reduction of myenteric neurons of the rat colon / Diferentes inóculos de Toxoplasma gondii induzem a redução de neurônios mioentéricos no cólon de ratos

Abstract Toxoplasmosis, a disease caused by Toxoplasma gondii, is an important health problem, especially in immunocompromised hosts. T. gondii uses the gut wall as an infection gateway, with tropism for muscular and nervous tissues causing intestinal alterations, including some in the enteric nervous system. This study aims at investigating the colon of rats infected by T. gondii in order to understand how the amount of oocysts influences in myenteric neuronal changes. Sixty Wistar rats (Rattus norvegicus) were divided into six groups. One group remained as a control and the others received inocula of 10, 50, 100, 500 or 5,000 oocysts of T. gondii. The animals were euthanized after 30 days of infection. The total neuronal population and the nitrergic subpopulation in the colon myenteric plexus of each animal was counted. The data were statistically analyzed showing less weight gain in rats with 10, 500 and 5,000 oocysts. A decrease in the number of total neurons with 50, 100 or 5,000 oocysts and an increase in the nitrergic population with 10, 100, 500 or 5,000 oocysts were verified. These results show that neuronal alterations are more significant when the infection is induced by larger inocula and reinforces the suspicion that neuronal loss is directed at cholinergic neurons.

Resumo A toxoplasmose, doença causada pelo Toxoplasma gondii, é um importante problema de saúde, principalmente em imunocomprometidos. T. gondii utiliza a parede do intestino como porta de entrada no hospedeiro e tem tropismo pelos tecidos muscular e nervoso provocando alterações intestinais, inclusive no sistema nervoso entérico. Este estudo buscou analisar o cólon de ratos infectados por T. gondii para entender como a quantidade de oocistos influencia nas alterações neuronais mientéricas. Foram utilizados 60 ratos Wistar (Rattus norvegicus) em seis grupos. Um dos grupos permaneceu como controle e os demais receberam inóculos de 10, 50, 100, 500 ou 5.000 oocistos de T. gondii. Os animais foram submetidos a eutanásia após 30 dias de infecção. No plexo mientérico do cólon dos animais foram quantificadas a população neuronal total e a subpopulação nitrérgica. Os dados foram analisados estatisticamente demonstrando inferior ganho de peso nos ratos com 10, 500 e 5.000 oocistos. Verificamos diminuição no número de neurônios totais com inóculos de 50, 100 ou 5.000 oocistos e aumento da população nitrérgica com 10, 100, 500 ou 5000 oocistos. Estes resultados mostram que alterações neuronais são mais significativas quando a infecção é induzida por inóculos maiores e reforça a suspeita de perda neuronal direcionada a neurônios colinérgicos.

Análise morfoquantitativa e ultraestrutural dos componentes do plexo mioentérico do intestino delgado de ratos submetidos à dieta padrão de Moçambique nos períodos pré e pós-natal / Morphoquantitative and ultrastructural analysis on the myenteric plexus components of the rats small intestine with standard Mozambique diet in the pre and postnatal period

Admite-se que mais de 40% das crianças são acometidas pela desnutrição crônica em Moçambique (África Oriental). A doença pode estar relacionada, entre outros fatores, à qualidade da dieta que é oferecida à população, já que é bastante precária, pois exibe sérias deficiências de ferro, gordura e, principalmente, proteína animal em sua composição. Essa insuficiência proteica poderia acarretar em prejuízo ao desenvolvimento do organismo, pois a proteína animal é considerada uma boa fonte de aminoácidos essenciais, em decorrência de sua maior digestibilidade e absorção no intestino delgado, quando comparadas às fontes de origem vegetal. Na presente pesquisa foi reproduzida em laboratório, a dieta básica da população de Moçambique (DM), com o objetivo de avaliar seus efeitos nos componentes do plexo mioentérico e na mucosa dos segmentos do intestino delgado de ratos Wistar. Para isso, os animais foram divididos nos grupos Controle, com dieta AIN-93G com adição de 20% de caseína (NN21 e NN42); Dieta de Moçambique (DM21 e DM42) e Dieta Moçambique suplementada, acrescida de 20% de caseína (NM21 e NM42); e grupo Renutrido (RM42), composto por animais do grupo DM21 que, a partir do 22º dia, receberam a dieta NM até atingirem 42 dias de vida. Os segmentos foram coletados e submetidos às técnicas histoquímicas da NADH-diaforase e da NADPH-diaforase para evidenciação de neurônios do plexo mioentérico; histológicas (HE, Picro-sírius, Weigert) para avaliação da parede intestinal, mucosa, gânglios e seu tecido conjuntivo associado; de microscopia eletrônica de varredura (MEV) para observação da estrutura da mucosa; e de microscopia eletrônica de transmissão (MET) para a ultraestrutura dos componentes ganglionares. Estatisticamente, o peso corporal e o comprimento dos animais submetidos à dieta de Moçambique estavam abaixo dos valores encontrados para os animais controle. Na análise qualitativa, observou-se a presença de fibras elásticas, elaunínicas e oxitalânicas,...

It is assumed that more than 40% of children are affected by chronic malnutrition in Mozambique (East Africa). The disease may be related, among other factors, the quality of diet that is offered to the population, since it is quite precarious, because it displays serious deficiencies of iron, fat and especially animal protein in their composition. This protein failure could result in damage to the development of the organism, as animal protein is considered a good source of essential amino acids, due to its higher digestibility and absorption in the small intestine when compared to vegetable sources. In this research has been reproduced in the laboratory, the staple diet of the population of Mozambique (DM), in order to evaluate its effects on components of the myenteric plexus and the mucosa of the small intestine segments of Wistar rats. For this, the animals were divided into control groups with AIN-93G diet with the addition of 20% casein (NN21 and NN42); Diet Mozambique (DM21 and DM42) and diet supplemented Mozambique, plus 20% casein (NM21 and NM42); and Refeeding group (RM42), consisting of the animals DM21 group, from the 22th day, given NM diet until they reached 42 days of life. The segments were collected and submitted to histochemical techniques of NADH-diaphorase and NADPH-diaphorase for disclosure of neurons of the myenteric plexus; histologic (HE, Sirius red, Weigert) for evaluation of the intestinal wall, mucosa, lymph nodes and its associated connective tissue; scanning electron microscopy (SEM) for observation of mucosal structure; and Transmission electron microscopy (TEM) ultrastructure to ganglion components. Statistically, body weight and length of the animals submitted to Mozambique diet were below the values found for control animals. Qualitative analysis showed the presence of elastic fibers, and elauninic oxytalan, and predominance of type I collagen fibers in the NN42 and DM42 groups, and type III in the NM42 and RM42 groups around...

Efeito da atividade física moderada sobre neurônios mioentéricos nitrérgicos do íleo de ratos de meia idade / The effect of moderate physical activity on myoenteric nitrergic neurons in the ileum of middle-aged rats / Efecto de la actividad física moderada en neuronas mientéricas nitrérgicas del íleon de ratas de mediana edad

Poucos são os relatos a respeito do efeito da atividade física sobre o plexo mioentérico ao longo do envelhecimento. Portanto, analisaram-se os neurônios mioentéricos NADPH-diaforase positivos do íleo em ratos que envelheceram praticando atividade física a partir dos seis meses de vida. Dez ratos Wistar foram distribuídos em dois grupos (n = 5/grupo): S (ratos sedentários controles com 12 meses de idade) e T (ratos treinados com 12 meses de idade). Os animais do grupo T realizaram, dos seis aos 12 meses de idade, atividade física regulada conforme resultados obtidos em teste de esforço máximo. Ao final do período experimental, o íleo obtido de cada animal foi processado para a técnica de NADPH-diaforase para evidenciar neurônios mioentéricos em preparados de membrana e quantificar e mensurar a área do pericário desses neurônios. A área do pericário não diferiu (P> 0,05) entre o grupo S (218,49 µm2) e o grupo T (210,59 µm2). A média de neurônios presente em 60 campos microscópicos de preparados de membranas no grupo S (126 neurônios) foi superior (P<0,05) a média encontrada no grupo T (93 neurônios), sugerindo que a atividade física pode inibir ou diminuir a expressão dos neurônios nitrérgicos em ratos de 12 meses de idade que praticaram atividade física desde os seis meses de vida. Os resultados quantitativos sugerem que a falta de atividade física regular propicia aumento na atividade dos neurônios nitrérgicos, contribuindo para o surgimento dos distúrbios da motricidade gastrointestinal que podem ocorrer ao longo do envelhecimento.

There are only a few reports on the effect of physical activity in the myoenteric plexus throughout the aging process. For such, the positive myoenteric NADPH-diaphoresis neurons in the ileum of those rats that aged practicing physical activity from the sixth month were analyzed. Ten Wistar rats were distributed into two groups (n= 5/group): S (12 months-old control sedentary rats) and T (12 months-old trained rats). The animals from the T group practiced controlled physical activity from the age of 6 months to 12 months, according to the maximum effort test results. At the end of the experimental period, the ileum obtained from each animal was processed in the NADPH-diaphoresis technique to highlight myoenteric neurons in membrane preparations, and quantify and measure the perikaryon area from those neurons. The Perikaryon area did not differ (P>0.05) among the S group (218.49 µm2) and the T group (210.59 µm2). The average of neurons in 60 membrane preparations in the S group (126 neurons) was higher (P<0.05) than the average finding in the T group (93 neurons), indicating that the physical activity can inhibit or decrease the nitrergic expression in 12 month-old rats that have practiced physical activity from the age of 6 months. The quantitative results suggest that the lack of regular physical activity provides the elevation of nitrergic neurons, concurring to the emergence of gastrointestinal motility disorders that can occur during the aging process.

Hay pocos informes sobre el efecto de la actividad física sobre el plexo mientérico a lo largo del envejecimiento. Por lo tanto, se analizaron las neuronas mientéricas NADPH-diaforasa positivas del íleon en ratas que envejecieron practicando actividad física a partir de seis meses de vida. Diez ratas Wistar se dividieron en dos grupos (n = 5 / grupo): S (ratas sedentarias de control con 12 meses de edad) y T (ratas entrenadas con 12 meses de edad). Los animales del grupo T realizaron, de los seis a los doce meses de edad, actividad física regulada conforme resultados obtenidos en prueba de esfuerzo máximo. Al final del período experimental, el íleon obtenido de cada animal se procesó por la técnica de NADPH-diaforasa para mostrar las neuronas mientéricas en preparados de membrana, cuantificar y medir el área del pericario de esas neuronas. El área del pericario no difirió (P> 0.05) entre el grupo S (218.49 µm2) y el grupo T (210.59 µm2). El número medio de neuronas presentes en 60 campos microscópicos de preparados de membranas en el grupo S (126 neuronas) fue mayor (P <0,05), promedio encontrado en el grupo T (93 neuronas), lo que sugiere que la actividad física puede inhibir o disminuir la expresión de las neuronas nitrérgicas en ratas de 12 meses de edad que practicaron actividad física desde los seis meses de edad. Los resultados cuantitativos sugieren que la falta de actividad física regular promueve aumento en la actividad de las neuronas nitrérgicas, contribuyendo a la aparición de disturbios de la motricidad gastrointestinal que pueden ocurrir a lo largo del envejecimiento.

Abnormalities of digestive tract innervation in rat fetus treated with ethylenethiourea / Anomalias da inervação do trato digestório de fetos de ratas expostas à etilenotioureia

PURPOSE: The pathophysiology of abnormalities associated with myenteric plexus lesions remains imperfectly understood. Such abnormalities have been correlated with subocclusive intestinal conditions in children with Hirschsprung's disease, cases of chronic constipation and, postoperatively, in cases of anorectal anomalies. This study evaluated abnormalities of the myenteric plexus in fetus from female rats that received ethylenethiourea. METHODS: Female rats were exposed to ethylenethiourea on the 11th day of pregnancy (experimental group) or to 0.9 percent physiological solution (control group). Abnormalities were only found in the experimental group. The digestive tract muscle layer was analyzed morphometrically and changes to the frequencies of nerve plexus cells and interstitial cells of Cajal were evaluated, using hematoxylin-eosin, S-100 protein, neuron-specific enolase and C-Kit, respectively. RESULTS: Muscle and skeletal abnormalities were observed in 100 percent, anorectal anomalies in 86 percent, absent tail in 71 percent, short tail in 29 percent, duodenal atresia in 5 percent, esophageal atresia in 5 percent and persistent omphalomesenteric duct in 5 percent. Histopathological analysis showed a thinner muscle layer associated with lower frequencies of ganglion cells and interstitial cells of Cajal, in all gastrointestinal tract. CONCLUSION: Severe nerve plexus abnormalities associated with muscle layer atrophy were observed throughout the gastrointestinal tract in newborn rats exposed to ethylenethiourea.

OBJETIVO: As anomalias associadas a lesões dos plexos mioentéricos permanecem sem plena compreensão da sua fisiopatologia. Alterações nos plexos nervosos têm sido correlacionadas com quadros suboclusivos intestinais em crianças portadoras de doença de Hirschsprung, em constipação crônica e no pós-operatório de anomalias anorretais. Este estudo avaliou as anomalias do plexo mioentérico em fetos de ratos fêmea que ingeriram etilenotioureia (ETU). MÉTODOS: Ratos fêmea foram expostos no 11º dia de gestação a ETU 1 por cento no Grupo Experimento e a solução fisiológica 0,9 por cento no Grupo Controle. Foram observadas anomalias apenas no Grupo experimento, sendo realizada morfometria da camada muscular e avaliadas alterações da frequência celular nos gânglios do plexo mioentérico e nas células intersticiais de Cajal (CIC) utilizando hematoxilina-eosina, P S-100, Enolase Neurônio Específica e C-KIT. RESULTADOS: Foram observadas anomalias musculoesqueléticas (100 por cento), anorretais (86 por cento), ausência de cauda (71 por cento), cauda curta (29 por cento), atresia duodenal (5 por cento), atresia esofágica (5 por cento) e conduto onfalomesentérico persistente (5 por cento). A análise histopatológica mostrou adelgaçamento da camada muscular associada às alterações da frequência das células ganglionares e das CIC em todos os segmentos do trato gastrointestinal. CONCLUSÃO: Foram observadas alterações graves nos plexos nervosos associadas ao adelgaçamento da camada muscular de todo o trato gastrointestinal nos fetos expostos a ETU.

Analysis of myosin-V immunoreactive myenteric neurons from arthritic rats / Análise dos neurônios mioentéricos miosina-V imunoreativos de ratos artríticos

CONTEXT: The inflammatory response itself and the consequent oxidative stress are able to promote neurodegeneration. So, it is possible that enteric nervous system is affected by inflammatory diseases threatening quality of life of patients. However, gastrointestinal symptoms of arthritis are usually attributed to anti-inflammatory drugs rather than neural damage. OBJECTIVE: To confirm if the general population of myenteric neurons from the ileum and jejunum of rats is affected by arthritis. METHODS: Twenty Holtzmann rats, 58-day-old male, were used and divided in four groups: control group (C30), arthritic group (Art30), older control group (C60) and older arthritic group (Art60). At 58 days old, the animals in groups Art30 and Art60 received an injection of the complete Freund's adjuvant in order to induce arthritis. The whole-mount preparations of ileum and jejunum were processed for myosin-V immunohistochemistry. Quantitative and morphometric analyses were performed. RESULTS: Groups Art30 and Art60 presented, respectively, a reduction of 2 percent and 6 percent in intestinal area when compared to their control groups. No significant differences were observed in general neuronal density among the four groups (P>0.05). Group C60 presented a reduction of 14.4 percent and 10.9 percent in mean neuronal cell body area when compared to group C30 (P<0.05), for the ileum and jejunum, respectively. The other groups had a similar mean neuronal cell body area (P>0.05). CONCLUSION: Arthritis does not promote quantitative or morphological damages in general myenteric population. However, studies in progress have revealed some significant alterations in myenteric neurons subpopulations (nitrergic and VIP-ergic neurons).

CONTEXTO: A resposta inflamatória e o estresse oxidativo acentuados em decorrência da artrite reumatóide são capazes de promover neurodegeneração. Nessas condições, é possível que o sistema nervoso entérico seja afetado, diminuindo a qualidade de vida dos pacientes. No entanto, os sintomas da artrite no trato gastrointestinal são geralmente associados ao uso de medicamentos anti-inflamatórios do que a um possível dano neural. OBJETIVO: Verificar se a população geral de neurônios mioentéricos do íleo e do jejuno de ratos artríticos é afetada pela artrite. MÉTODOS: Foram utilizados 20 ratos Holtzmann, inicialmente com 58 dias de idade, divididos em 4 grupos: controle com 88 dias (C30); artrítico com 88 dias (Art30); controle com 118 dias (C60) e artrítico com 118 dias (Art60). Os animais dos grupos Art30 e Art60 receberam aos 58 dias de idade o adjuvante completo de Freund para indução da artrite. Os preparados totais de íleo e jejuno foram submetidos a imunoistoquímica para a proteína miosina-V. Realizou-se análises quantitativas e morfométricas dos neurônios. RESULTADOS: Os animais Art30 e Art60 apresentaram, respectivamente, redução de 2 por cento e 6 por cento na área intestinal em relação aos seus controles. Não foram observadas diferenças na densidade neuronal geral entre os quatro grupos (P>0,05). O grupo C60 apresentou redução de 14,4 por cento e 10,9 por cento na área média do corpo celular neuronal em relação ao grupo C30 (P<0,05). Os demais grupos apresentaram área média de corpo celular semelhante (P>0,05). CONCLUSÃO: A artrite não provocou alterações quantitativas ou morfológicas na população mioentérica geral, entretanto, estudos em andamento revelam alterações significativas em subpopulações de neurônios mioentéricos (nitrérgicos e VIP-érgicos).

Toxoplasma gondii induces death of gastric myenteric neurons in rats / Toxoplasma gondii induce la muerte de neuronas del plexo mientérico gástrico en ratas

The aim of the study was quantifying and morphologically analyzing the myenteric neurons of the small and large gastric curvatures of the glandular stomach of rats infected the tachyzoites of the Toxoplasma gondii for 30 days. Ten male rats were assigned into two groups: Control Group (CG) and Experimental Group (EG). The animals from the CG received saline solution orally whereas the EG animals received 104 tachyzoites of the T. gondii genotype III strain (BTU II). After 30 days, euthanasia was conducted for the removal of the stomach, which was dissected under the stereomicroscope for removal of the tunica mucosa and the tela submucosa. Whole mounts were stained with Giemsa. Quantification of the myenteric neurons was conducted by using a 40X-objective microscope in 40 microscopic fields for the region of the small gastric curvature and 40 fields for the large gastric curvature of the glandular stomach of the animals from both groups. The cell body of 50 myenteric neurons from each region was measured for each animal. Chronic experimental infection caused by the genotype III strain of Toxoplasma gondii was verified to reduce myenteric neuron density only in the small gastric curvature region of the glandular stomach, not resulting in significant changes in the size of the neurons.

Este estudio tuvo como objetivos cuantificar y analizar morfológicamente neuronas del plexo mientérico de las curvaturas gástricas menor y mayor del estómago glandular de ratones infectados durante 30 días por taquizoítos de Toxoplasma gondii. Fueron utilizados 10 ratas machos distribuidos aleatoriamente en dos grupos: grupo control (GC) y grupo experimental (GE). Los animales del GC recibieron solución salina por vía oral y los animales del GE recibieron, por la misma vía, 104 taquizoítos de Toxoplasma gondii de una cepa genotipo III (cepa BTU II). Tras 30 días, se realizó eutanasia para retirar el estómago, que fue disecado bajo el estereomicroscopio para retirar la túnica mucosa y tela submucosa. Preparados de membrana fueron coloreados por la técnica de Giemsa. La cuantificación de neuronas mientéricas se realizó con microscopía óptica, con objetivo de 40X en 40 campos microscópicos para la región de la curvatura gástrica menor y 40 campos para la curvatura gástrica mayor del estómago glandular, en ambos grupos. Se midió el área del cuerpo celular de 50 neuronas mientéricas de cada región en cada animal. Se verificó que la infección experimental crónica provocada por la cepa de genotipo III de Toxoplasma gondii en ratones, redujo la densidad de neuronas mientéricas solamente en la región de curvatura gástrica menor del estómago glandular, no llevando a alteraciones significativas el tamaño de las neuronas.

Effects of L-glutamine supplementation on the myenteric neurons from the duodenum and cecum of diabetic rats / Efeitos da suplementação com L-glutamina sobre os neurônios mioentéricos do duodeno e jejuno de ratos diabéticos

CONTEXT: Peripheral neuropathy is one of the chronic complications of diabetes mellitus and is directly related to gastrointestinal consequences of the disease. Myenteric neurons are affected in some pathological conditions such as diabetic neuropathy. The imbalance between cellular antioxidants and free radicals, leading to an increase in oxidative stress, is considered one of the main factors responsible for neuronal damages in diabetes. Drugs that reduce the oxidative stress may play a significant role in the treatment of neurological complications of diabetes mellitus. OBJECTIVE: To evaluate the effect of L-glutamine supplementation on the myenteric neurons from the cecum and duodenum of Wistar rats with streptozotocin-induced diabetes mellitus. METHODS: The animals were divided in four groups (n = 5): non-treated normoglycemics, normoglycemics treated with L-glutamine, non-treated diabetics and diabetics treated with L-glutamine from the 4th day of diabetes induction on. The amino acid L-glutamine was added to their diet at 1 percent. Giemsa's technique was employed to stain the myenteric neurons. We determined the cell body area of 500 neurons in each group studied. The quantitative analysis was performed by sampling in an area of 16.6 mm² in the cecum and 3.6 mm² in the duodenum of each animal. RESULTS: After the supplementation with L-glutamine in the duodenum, we observed a preservation of neuronal density in groups normoglycemic and diabetic (P<0.05). We also observed a preservation of the cell bodies area in diabetic animals (group treated with L-glutamine) (P<0.05). In the cecum, that preservation was not evident. CONCLUSION: Supplementation with L-glutamine (1 percent) promoted a neuroprotective effect on the myenteric neurons from the duodenum of rats, both in terms of natural aging and of diabetes mellitus.

CONTEXTO: Os neurônios entéricos são afetados em condições patológicas, como a neuropatia diabética. A neuropatia periférica é uma das complicações crônicas do diabetes mellitus e está diretamente relacionada com as manifestações gastrointestinais da doença. O desequilíbrio entre antioxidantes celulares e radicais livres, com o consequente aumento do estresse oxidativo, é considerado um dos principais responsáveis pelas alterações neuronais provocadas pelo diabetes. Drogas que reduzem o estresse oxidativo podem ter papel relevante no tratamento das complicações neurológicas do diabetes mellitus. OBJETIVO: Avaliar os efeitos da suplementação com L-glutamina sobre os neurônios mioentéricos do ceco e duodeno de ratos Wistar com diabetes mellitus induzido pela estreptozootocina. MÉTODOS: Os animais foram divididos em quatro grupos (n = 5): normoglicêmicos, normoglicêmicos suplementados com L-glutamina, diabéticos, diabéticos suplementados com L-glutamina a partir do 4º dia da indução do diabetes. O aminoácido L-glutamina foi adicionado à ração na quantidade de 1 por cento. A técnica de Giemsa foi utilizada para evidenciar os neurônios mioentéricos. Foram avaliadas as áreas de corpos celulares de 500 neurônios em cada grupo estudado. A análise quantitativa foi realizada em uma área de 16,6 mm² no ceco e 3,6 mm² no duodeno de cada animal. RESULTADOS: Após suplementação com L-glutamina verificou-se no duodeno a preservação da densidade neuronal tanto nos animais normoglicêmicos quanto nos animais diabéticos (P<0,05), e também o restabelecimento da área do corpo celular nos animais diabéticos (P<0,05). No ceco esta preservação e restabelecimento não foram evidenciados. CONCLUSÃO: A suplementação com L-glutamina (1 por cento) teve efeito neuroprotetor sobre os neurônios mioentéricos do duodeno tanto em condições de envelhecimento natural como no diabetes mellitus.

Estudo morfológico e imuno-histoquímico do plexo mientérico das válvulas confeccionadas no colo de ratos submetidos à amputação abdominoperineal e colostomia perineal / Morphological and immunohistochemical study of the myenteric plexus of valves made in the neck of rats submitted to abdominoperineal amputation and perineal colostomy

Colostomia abdominal definitiva após amputação abdominoperineal é uma cirurgia estabelecida, mas não é isenta de morbidades. A proposta de substituição a ela é a técnica da colostomia perineal que preenche as exigências atuais do tratamento do câncer de reto, porque ela não interfere na radicalidade da cirurgia proposta, evita a colostomia abdominal definitiva, preenche o vazio pélvico e é contentiva. O estudo das válvulas cirúrgicas confeccionadas no segmento do intestino abaixado permitirá o conhecimento da natureza histológica das mesmas e o seu aprimoramento. O objetivo é estudar os aspectos morfológicos e imuno-histoquímicos do plexo mientérico das válvulas confeccionadas e a adjacência da terceira válvula e a espessura das camadas musculares e de tecido conjuntivo da parede intestinal nas adjacências da terceira válvula. Propõe-se contribuir na elucidação dos mecanismos que promovem o retardo do conteúdo intestinal ou a continência parcial e a natureza deste tecido. Foram operados 36 ratos, distribuídos em 3 grupos. No Grupo simulado, 6 animais foram submetidos a laparotomia. No Grupo Amputado, 6 animais foram submetidos à amputação do conjunto esfincteriano e colostomia perineal. No Grupo Amputado com Válvula, 24 animais foram submetidos à confecção de três seromiotomias 9secçao das camadas serosa, musculares longitudinal e muscular circular) no colo abaixado, amputação do conjunto esfincteriano e colostomia perineal. No 40º dia pós-operatório o segmento intestinal foi submetido à estudo morfológico e imunohistoquímico da seguinte forma: estudo microscópico descritivo (Hematoxilina Eosina) no segmento operado, no local da seromiotomia e a montante e ajusante à terceira válvula; análise morfométrica e imunohistoquímica (Produto Gênico Protéico 9.5 que evidencia os elementos do sistema nervoso entérico) no local da seromiotomia e a montante e ajusante à terceira válvula; Tricrômico de Gomori e a medida linear da espessura das camadas serosa, muscular longitudinal e muscular circular a montante e ajusante à terceira válvula. A microscopia descritiva (Hematoxilina Eosina) da parede intestinal na região da válvula revela uma inflamação crônica, com presença de células gigantes do tipo corpo estranho, e uma interrupção linear microscópica das camadas musculares, região que apresenta deposição de tecido conjuntivo vascular e colágeno, com ausência da inervação no local da seromiotomia. A observação sistemática das áreas adjacentes à válvula mostra aspecto estrutural preservado das camadas musculares longitudinal e circular. A coloração com Tricrômico de Gomori mostra deposição de colágeno principalmente na área próxima à intervenção cirúrgica, sem revelar diferenças quantitativas entre os grupos nas áreas adjacentes à terceira válvula. As espessuras das camadas musculares longitudinal e circular não variaram significativamente nas amostras estudadas. A imunoexpressão do Produto Gênico Protéico 9.5, mostra diminuição da densidade do plexo mientérico estatisticamente significativo no local da seromiotomia. A densidade dos elementos nervosos da camada muscular circular nos locais adjacentes a 3ª válvula não foi estatisticamente diferente. A conclusão do estudo morfológico e imunohistoquímico das válvulas confeccionadas no colo esquerdo de ratos submetidos à amputação abdominoperineal e colostomia perineal mostra uma desnervação no local da seromiotomia que contribui para o retardo do fluxo intestinal e uma preservação dos elementos musculares e de tecido conjuntivo da parede intestinal e dos elementos nervosos nos locais interválvulas.

Definitive abdominal colostomy (DAC) following abdominoperineal amputation is an established surgical technique, but it is not free of morbidities. The technique proposed for avoiding DAC is abdominoperineal amputation with perineal colostomy, as it meets the current requirements for the treatment of rectal cancer because it does not interfere with the radicality of the proposed surgery, avoids the need for definitive abdominal colostomy, fills the pelvic hollow and is contentive. The valves constructed in the intestinal segment to make the perineal colostomy continent must be studied from a histological point of view. The goal is contribute towards the elucidation of the mechanisms that promote the retardation of the intestinal contents or partial continency. The aim is to study the morphological and immunohistochemical studies of the myenteric plexus of the valves manufactured and the third valve and the adjacent muscle layers and connective tissue of the intestinal wall adjacent to the third valve. A total of 36 rats were operated on, which were distributed into 3 groups. In the Simulated Group, 6 animals were subjected to a laparotomy. In the Amputated Group, 6 animals were subjected to the amputation of their sphincter structure and to perineal colostomy. In the Amputated Group with Valve, 24 animals underwent three seromyotomy procedures (section of the serous muscular, longitudinal, myenteric plexus and circular muscular layers) on the pulled-through colon, the amputation of the sphincter structure and perineal colostomy. On the 40th postoperative day the intestinal segment underwent morphological and immunohistochemical study in the following manner: descriptive microscopy (Hematoxylin and Eosin stain) on the segment operated on, at the site of the seromyotomy and upstream and downstream of the third valve; morphometric and immunohistochemical analyses (Protein Gene Product 9.5 which confirms the existence of the enteric nervous system elements) at the location of the seromyotomy and upstream and downstream of the third valve; Gomori trichrome stain and the linear measurement of the thickness of the serous, longitudinal muscular and circular muscular layers upstream and downstream of the third valve. The descriptive microscopy (Hematoxylin and Eosin stain) of the intestinal wall in the region of the valve reveals a chronic inflammation, cicatricial, with fibrous replacement tissue, restricted to the location, and a microscopic linear interruption of muscle layers, a region which presents deposits of collagenous and vascular conjunctive tissue, with an absence of enervation at the seromyotomy site. A systematic observation of the areas adjacent to the valve shows that the structural aspect of the longitudinal and circular muscular layers was preserved. Coloration with Gomori trichrome stain shows deposits of collagen mainly in the area near the surgical intervention, without revealing quantitative differences among the groups in the areas adjacent to the third valve. The thicknesses of the muscle layers, both longitudinal and circular, did not vary significantly in the samples studied. Immunoexpression of Protein Gene Product 9.5 demonstrates the total absence of nervous elements and of the myenteric plexus at the site of the valve. The density of the nervous elements of the circular muscular layer at sites adjacent to the 3rd valve was not statistically different. The conclusion of the morphological and immunohistochemical study of the valves constructed in the left colon of rats subjected to abdominoperineal amputation and perineal colostomy shows the denervation at the serotomy site, which contributes to the retardation of the intestinal flow and the preservation of the muscular elements, of the conjunctive tissue, of the nervous elements and of the myenteric plexus of the intestinal wall at the intervalvular sites.

Análise morfométrica dos neurônios da curvatura gástrica maior glandular de ratos induzidos ao alcoolismo / Morphometric analysis of gastric neurons of the greater curvature glandular of rats induced to alcoholism

Objetivo: analisar os efeitos do álcool sobre a morfometria dos neurônios do plexo mioentérico da curvatura gástricamaior glandular de ratos submetidos à ingestão crônica de álcool. Método: utilizados 14 ratos Wistar, com 90 dias,distribuídos em: Controle (GC, n=7) e Experimental (GE, n=7). O GC recebeu durante 120 dias ração para roedorese água ad libitum, enquanto o GE recebeu ração e aguardente de cana ad libitum, diluída em água em concentraçõescrescentes de 5% até 30%. A curvatura maior do estômago glandular foi submetida à realização de preparados demembrana de acordo com o método de Giemsa. Foram mensurados 40 campos microscópicos de cada animal. Os cálculosestatísticos realizados utilizando-se o software Prisma 2.0, por meio do teste T de Student com nível de significânciade 5%. Resultados: verificou-se que média da área dos neurônios no GC foi de 43,56±2,69 ?m2 e no GE de 56,03±2,16 ?m2. Quando comparados os pesos finais dos dois grupos observamos que os animais experimentais tiveram umaredução de peso corporal de 18,94% em relação aos controles, com p=0.0002. Conclusão: a ingesta crônica de álcoolem ratos aumentou a área neuronal da curvatura maior do estômago glandular

Objective: to analyze the alcohol effects on the neurons? morphology in the myenteric plexus of the greater gastriccurvature of rats? glandular stomach subjected to chronic alcohol ingestion. Method: 14 Wistar rats with 90 days wereused, distributed into two groups: Control Group (CG n=7) and Experimental Group (EG n = 7). CG animals receivedfood and water ad libitum during 120 days, while EG animals received food and sugar cane brandy ad libitum dilutedin water at increasing concentrations from 5% to 30%. The greater gastric curvature of rats, glandular stomach wassubjected to implementation of membrane preparations according to the Giemsa?s method. 40 microscopic s weremeasured for each animal. Statistical calculations were performed using Prism 2.0 software and t-Student test withsignificance level of 5%. Results: it was identified that neurons? average area in CG was 43,56 ± 2,69 ?m2 and 56,03 ±2,16 ?m2 in EG. When comparing both groups? final weights it was observed that experimental animals had a reductionof body weight of 18.94% when compared to the control group, p = 0.0002. Conclusion: chronic alcohol ingestion inrats increased greater gastric curvature neurons of glandular stomach

Atrofia neuronal mientérica no íleo de ratos infectados cronicamente por uma cepa genótipo i de Toxoplasma gondii / Myenteric neuronal atrop hy induced by chronic infection caused by a genotype i Toxoplasma gondii strain in the rat ileum / Atrofia neuronal mientérica en el íleon de ratas infectadas cronicamente por una cepa genotipo i de Toxoplasma gondii

A toxoplasmose é uma zoonose que desperta grande preocupação na saúde pública em nível mundial. No Brasil, os índices de soropositividade para Toxoplasma gondii variam entre 54% e 75% da população. Neste estudo objetivou-se avaliar os efeitos da infecção crônica, causada por uma cepa genótipo I de T. gondii, sobre o número e a morfometria de neurônios mientéricos do íleo terminal de ratos. Foram utilizados oito ratos (Rattus norvegicus) Wistar machos. O grupo experimental foi inoculado oralmente com 105 taquizoítos de uma cepa genótipo I de T. gondii. Após 30 dias de infecção, os animais foram submetidos à eutanásia, e por meio de laparotomia, o jejuno-íleo foi retirado, mensurado em seu comprimento e largura para cálculo de área. O íleo terminal de cada animal foi dissecado para confecção de preparados totais, os quais foram corados pela técnica de Giemsa. Não foram observadas alterações no peso corporal, comprimento ou área intestinal, apenas a largura do jejuno-íleo sofreu aumento. Não houve alteração significativa em relação à análise quantitativa dos neurônios. Na análise morfométrica, observou-se redução da área do pericário, do núcleo e do citoplasma dos neurônios mientéricos do grupo experimental. No que se refere à frequência de neurônios nas diferentes classes de intervalo da área do pericário, não houve alterações significativas. Entretanto, houve um aumento do número de neurônios cujos núcleos representavam de 21 a 30% de seu pericário e uma redução no número daqueles em que o núcleo representava 51-60% e mais que 71%.

Toxoplasmosis is a zoonosis which causes a great worldwide public health concern. In Brazil, T.gondii seropositivity indexes range from 54% to 75% of the population. This study assesses the effects of chronic infection caused by a genotype I Toxoplasma gondii strain over the amount and morphometrics of myenteric neurons of rat terminal ileum. Eight male Wistar rats (Rattus norvegicus) were used. The experimental group was orally inoculated with 105 tachyzoites from a genotype I strain of Toxoplasma gondii. The animals were submitted to euthanasia 30 days after the infection. Blood sampling was carried out by punctioning the retro-orbital plexus in order to detect anti-T.gondii seric antibodies. The ileum-jejunum was removed, measured with respect to its total length and width for the calculation of its area through laparotomy. The ileum from each animal was collected, dissected and stained with Giemsa. Alterations concerning body weight, length or intestinal area were not observed, however, the width of the ileum-jejunum had increased. There were no significant alterations with respect to the quantitative analysis. Reduction of the area of the perikarium, nucleus, and cytoplasm of the myenteric neurons from the experimental group were noticed through morphometric analysis. There were no significant alterations with respect to the incidence of neurons within the different interval classes of the perikarium area. However, there was an increase of the amount of neurons whose nuclei presented 21-30% of their perikarium as well as the reduction of those in which the nucleus presented 51-60%, and higher than 71%.

La toxoplasmosis es una zoonosis que despierta mucha preocupación en la salud pública a nivel mundial. En Brasil, los índices de soropositividad para Toxoplasma gondii varían entre 54% y 75% de la población. El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos de la infección crónica, causada por una cepa genotipo I de T. gondii, sobre el número y la morfometría de neuronas mientéricas del íleon terminal de ratas. Fueron utilizadas 8 (ocho) ratas (Rattus norvegicus) Wistar machos. El grupo experimental fue inoculado oralmente con 105 taquizoítos de una cepa genotipo I de T. gondii. Después de 30 días de infección, los animales fueron sometidos a eutanasia, y a través de la laparotomía fue retirado el yeyuno-íleon, y así su anchura y longitud fueron medidas para cálculo del área. El íleon terminal de cada animal fue disecado para confección de preparados totales, los cuales fueron corados por la técnica de Giemsa. No fueron observadas alteraciones en el peso corporal, longitud o área intestinal, apenas en la anchura del yeyuno-íleon el cual sufrió aumento. No hubo alteraciones significativas con relación al análisis cuantitativo de las neuronas. En el análisis morfométrico, se observó reducción del área del pericario, del núcleo y del citoplasma de neuronas mientéricas del grupo experimental. Con relación a la incidencia de neuronas en las diferentes clases de intervalo del área del pericario, no hubo alteraciones significativas. Sin embargo, hubo un aumento en el número de neuronas cuyos núcleos representaban de 21 a 30% de su pericario y una reducción en el número de aquellos en que el núcleo representaba 51-60% y más que 71%.

Atrophy of the nitrergic myenteric neurons in the descending colon rats submitted to protein and vitamin deficiency / Atrofia en neuronas mientéricas nitrérgicas en el colon descendente de ratas sometidas a deficiencia de proteínas y vitaminas

Effects of protein and B-complex vitamin deficiency were assessed with respect to the morphometry of myenteric neurons in the descending colon of adult rats. Sixteen animals were divided into two groups: Control Group (CG, n=8) and Experimental Group (EG, n=8). The CG received 22 percent protein chow and the EG received 4 percent protein chow for 120 days. The descending colon was submitted to NADH- and NADPH-diaphorase technique in order to evidence nervous cells in the whole mounts preparations. In the EG, NADH-d positive neurons presented reduced nuclei, while NADPH-d positive neurons showed atrophy of the soma area (~41.7 percent) inducing an increase of the proportion occupied by the nucleus inside in the soma of these cells.

Esta investigación buscó evaluar los efectos de la desnutrición proteica y vitamínica delcomplexo B sobre aspectos morfométricos del plexo mientérico del colon descendente de ratones adultos. Dieciséis animales fueron distribuidos en dos grupos: control que recibieron ración comercial con 22 por ciento de proteína y experimental alimentados con ración de tenor proteico reducido para 8 por ciento, durante 120 días. Neuronas del plexo mientérico presentes en preparados totales fueron evidenciados a través de la técnica histoquímica de la NADH-diaforasa y de la NADPH-diaforasa. En el grupo experimental, las neuronas NADH-d positivos sufrieron reducción del núcleo celular, ya las neuronas NADPH-d sufrieron atrofia de 41,7 por ciento de la superficie de su pericarion, lo que hizo con que el núcleo celular pasase a ocupar una mayor proporción de la región trófica de las neuronas.

Effects of ascorbic acid supplementation in ileum myenteric neurons of streptozotocin-induced diabetic rats / Efeitos da suplementação do ácido ascórbico nos neurônios mientéricos do íleo de ratos diabéticos induzidos por estreptozootocina

The exacerbation of the oxidative stress and of the polyol pathway which impair damage myenteric plexus are metabolic characteristics of diabetes. The ascorbic acid (AA) is an antioxidant and an aldose reductase inhibitor, which may act as neuroprotector. The effects of AA supplementation on the density and cellular body profile area (CP) of myenteric neurons in STZ-induced diabetes in rats were assessed. Four groups with five animals each were formed: normoglycemic (C); diabetic (D); AA-treated diabetic (DS) and AA-treated normoglycemic (CS). Dosagen of 50mg of AA were given, three times a week, for each animal (group DS and CS). Ninety days later and after euthanasia, the ileum was collected and processed for the NADPH-diaphorase technique. There were no differences (P>0.05) in the neuronal density among the groups. The CP area was lower (P<0.05) in the DS and CS groups, with a higher incidence of neurons with a CP area exceeding 200µm² for groups C and D. The AA had no influence on the neuronal density in the ileum but had a neuroprotective effect, preventing the increase in the CP area and allowing a higher number of neurons with a CP area with less than 200µm².

A exacerbação do estresse oxidativo e da via do poliol que comprometem o plexo mioentérico são alterações metabólicas características do diabetes. O ácido ascórbico (AA) é antioxidante e inibidor da aldose redutase, podendo atuar como neuroprotetor. Verificaram-se os efeitos da suplementação com AA sobre o número e a área do perfil do corpo celular (PC) de neurônios mioentéricos em ratos diabéticos induzidos por estreptozootocina. Formaram-se quatro grupos com cinco animais cada: normoglicêmico (C); diabético (D); diabético tratado com AA (DS); e normoglicêmico tratado com AA (CS). Três vezes por semana administrou-se 50mg de AA para cada animal (grupos DS e CS). Após 90 dias e eutanásia com tiopental, o íleo foi coletado e processado para a técnica da NADPH-diaforase. Não se observaram diferenças (P>0,05) na densidade neuronal entre os grupos. A área do PC foi menor (P<0,05) para os grupos DS e CS, com incidência maior de neurônios com área do PC superior a 200µm² para os grupos C e D. Concluiu-se que o AA não influenciou a densidade neuronal do íleo, mas foi neuroprotetor prevenindo o aumento na área do PC e possibilitando maior incidência de neurônios com área de PC inferior a 200µm².

Efeitos da desnutrição protéica severa sobre aspectos morfológicos e quantitativos dos neurónios mientéricos do colón ascendente de ratos / Effects of severe protein malnutrition on morphomological and quantitave aspects of rat ascending colon myenteric neurons / Efectos de la desnutrición proteica severa sobre aspectos morfológicos y cuantitativos de las neuronas del plexo mientérico del colon ascendiente de ratones

Objetivou-se avaliar os efeitos da desnutrição protéica sobre os aspectos morfológicos e quantitativos do plexo mientérico do colón ascendente de ratos adultos. Os animais controle (n=5) receberam ração comercial com 26% de proteína e os animais experimentais (n=4) ração com teor protéico reduzido para 4%, durante 90 dias. Por dissecção, elaboramos preparados totais, que foram corados pela técnica de Giemsa. Os ratos desnutridos apresentaram peso corporal 43,14% menor. A média da área do colón ascendente e a densidade neuronal estavam, respectivamente, 38,90% menor e 25,79% maior, em relação aos animais do grupo controle. Não foi observada redução no número total de neurônios mientéricos do cólon nos animais desnutridos. Dados morfométricos demonstraram aumento na área do pericário destes neurônios.

The effects of protein malnutrition on morphological and quantitative aspects of the myenteric plexus of adult rat ascending colon. The control animals (n=5) received 26%-protein commercial feed while the experimental (n=4) received 4%-protein commercial feed for 90 days. Whole mount preparations were Giemsa stained for dissection. Malnourished rats presented 43.14% lighter body weight. The means of the ascending colon area and the neuronal density were 38.90% lower and 25.79% higher, respectively, in relation to the Control Group. No reduction of the total number of colon myenteric neurons of malnourished animals was noticed. Morphometric data showed an increase of the perikarium of these neurons.

Esta investigación tuvo como objeto evaluar los efectos de la desnutrición proteica sobre los aspectos morfológicos y cuantitativos del plexo mientérico del colon ascendiente de ratones adultos. Los animales control (n=5) recibieron ración comercial con 26% de proteína y los animales experimentales (n=4) ración con tenor proteico reducido para 4%, durante 90 días. Por disección, elaboramos preparados totales, que fueron coloreados por la técnica de Giemsa. Los ratones desnutridos presentaron peso corporal 43,14% menor. La media del área del colon ascendiente y la densidad neuronal estaban, respectivamente, 38,90% menor y 25,79% mayor, en relación a los animales del grupo control. No fue observada reducción en el número total de neuronas del plexo mientérico del colon, en los animales desnutridos. Datos morfométricos demostraron aumento en el área del pericario de estas neuronas.

Intestinal Auerbach plexus structures with NADH histochemistry in three strains of spontaneous diabetic rats / Estructuras del plexo de Auerbach intestinal con histoquímica del NADH en tres líneas de ratas espontáneamente diabéticas

The enteric nervous system comprises two major systems: the submucosal and the myenteric plexus. Theaim of this study was to describe the myenteric plexusfrom three strains of spontaneous diabetic rats from thehistological point of view. Samples of small intestineand of proximal and distal colon were obtained fromthree spontaneous diabetic rats i.e., eSS, eSMT, βstrains and 1-year old Wistar rats. Specimens werestained with NADH (β-nicotinamide adenine dinucleotide,reduced form) histochemical technique andexamined with light microscope. Microscopically little modifications in mesh-like structure of intestinal Auerbach’s plexus from eSS were detected in comparisonwith Wistar rats samples. Intestinal plexus of eSMT and β rats showed disruption of mesh-like structures, modifications in the slightly colored background (smooth muscle) and augmented vascularization. Small intestine and colon are affected. In short: In our spontaneously diabetic rat models, mesh-like structure of Auerbach’s plexus is strain dependent.

El sistema nerviso entérico comprende dos sistemas mayores: el plexo submucoso y el plexo mientérico. Este estudio describe la estructura histológica del plexo mientérico en tres líneas de ratas espontáneamente diabéticas. Especímenes de intestino delgado, colon proximal y colon distal fueron obtenidos de tres líneas de ratas espontáneamente diabéticas: eSS, eSMT, β y Wistar de 1 año de edad. Los materiales obtenidos fueron procesados con la técnica histoquímica del NADH (β-nicotinamida adenina dinucleotido, forma reducida) y observados en un microscopio óptico. Pequeñas modificaciones histológicas en la estructura reticular del plexo de Auerbach intestinal pueden ser detectados en las ratas eSS cuando son comparadas con las ratas Wistar. La estructura reticular del plexo de Auerbach de las ratass eSMT y β muestran una desaparición de dicha estructura reticular, disminución de la coloración de base (músculo liso) y un aumento de la vascularización. Tanto el intestino delgado como el colon están afectados. Resumiendo: en nuestros modelos experimentales de ratas diabéticas la estructura reticular del plexo de Auerbach es dependiente de la línea de rata estudiada.

Quantitative Study of the Myenteric Plexus of the Descending Colon of Young Rats Subjected to Intense Protein Deficiency / Estudio Cuantitativo del Plexo Mientérico del Colon Descendente de Ratas Jóvenes Sometidas a Intensa Deficiencia Proteica

We studied the effects of a severely hypoproteic diet on the quantitative aspects of the myenteric plexus of the descending colon of young rats. Eighteen rats were divided into two groups, one of them being fed with a chow having 26% protein (control) and the other with a chow having 4% protein, balanced for minerals and vitamins, during 12 weeks. The whole-mounts of the descending colon had their myenteric neurons stained either with Giemsa or NADPH diaphorase. The rats from the experimental group had deficits of body weight (54.23%) and area of the descending colon (48.14%); additionally, we observed that there was no alteration in the total number of neurons of the colon, but a decrease in the number of NADPH-diaphorase positive neurons (37.80%). The implications of these results concerning the priority that some cellular types may have when nutrients are less available are discussed.

Estudiamos los efectos crónicos de una dieta severamente hipoproteica sobre los aspectos cuantitativos del plexo mientérico del colon descendente de ratones jóvenes. 18 ratones fueron divididos en dos grupos, a uno de estos grupos se le dió ración con contenido proteico del 26% (control) y al otro, ración con contenido proteico del 4%. Se mantuvo el balance vitamínico y mineral, durante 12 semanas. Elaboramos los preparados de membrana del colon descendente y marcamos las neuronas del plexo mientérico con Giemsa y NADPH-diaforasa. Los ratones del grupo experimental presentaron déficit de peso corporal (54,23%) y del área del colon descendente (48,14%); además, observamos que no hubo alteración en el número total de neuronas en todo el colon; sin embargo, hubo una disminución en la marcación de neuronas NADPH-diaforasa positivas (37,80%). Los resultados son discutidos, respecto a la prioridad que ciertos tipos celulares pudiesen tener, con la menor disponibilidad de nutrientes.